5850 авторів і 31 редактор відповіли на 28952 питання,
розмістивши 29771 посилання на 8900 сайтів, приєднуйтесь!


Вірусологічні дослідження

РедагуватиУ обранеДрук

Вірусологічні дослідження - дослідження, призначені для виділення вірусів і вивчення їх властивостей, а також встановлення етіологічної зв'язку вірусів з певними захворюваннями.

Матеріал для дослідження забирається в залежності від місця переважного розмноження вірусів в організмі хворого і від шляхів їх виділення в зовнішнє середовище. Матеріал збирається в стерильний посуд, максимально швидко доставляється в лабораторію і зберігається до дослідження в замороженому вигляді або на льоду. Перед використанням матеріал для виділення вірусів обробляється антибіотиками (пеніцилін і стрептоміцин) Для придушення сторонньої мікрофлори і піддається центрифугированию для видалення великих частинок.

Виділення вірусів здійснюється шляхом зараження вируссодержащим матеріалом лабораторних тварин, курячих ембріонів, культури тканин. Вибір способу виділення залежить від передбачуваного збудника захворювання. Так, культури тканин (див.) Використовують при роботі з вірусами, що не патогенними для лабораторних тварин, або коли віруси в культурі тканин виявляються раніше, ніж при інфікуванні тварин. Курячі ембріони заражають для виділення збудників грипу, інфекційного паротиту (в амніотичну і аллантоісную порожнини), орнітозу (В жовтковий мішок), віспи (на хоріоналлантоісной оболонку).



З лабораторних тварин для виділення вірусів найбільш часто використовують білих мишей, потім кроликів, щурів, морських свинок, мавп. Для арбовирусов найбільш ефективно введення віруссодержащего матеріалу в головний або спинний мозок, для пневмотропних вірусів - на слизову оболонку дихальних шляхів, для вірусів віспи, герпесу - На скаріфіцірованную рогівку.

Виділення вірусів найбільш ефективно в гострому періоді захворювання. Суттєвим моментом у встановленні вірусної природи захворювання є результати серологічних досліджень сироваток, взятих повторно від одного і того ж хворого на початку захворювання і в період реконвалесценції. Виявлення антитіл до виділених вірусів у другій сироватці в титрі в 4 і більше разів більше, ніж у першій, вказує на етіологічний зв'язок вірусів з даним захворюванням.



Раннім і швидким методом виявлення вірусних антигенів є метод флуоресцентних антитіл, заснований на специфічній фіксації мічених флюорохромом антитіл на поверхні антигену. Антиген легко виявляється при люмінесцентної мікроскопії (див.) Завдяки яскравій флюоресценції адсорбованих на антигене антитіл. Методом флуоресцентних антитіл досліджують мазки, взяті від хворих, гістологічні зрізи уражених тканин, препарати з культури тканин. Для виявлення елементарних тілець (віріонів) застосовують також електронну мікроскопію (Див.). З інших морфологічних методів використовують ті, які виявляють внутрішньоклітинні вірусні включення в зрізах уражених органів і тканин. Виявлення включень свідчить про інфекцію і в ряді випадків сприяє постановці діагнозу вірусного захворювання. Для виявлення вірусних антитіл у крові хворих і для вивчення антигенної структури вірусів застосовують різні серологічні реакції. Реакцію нейтралізації застосовують майже при всіх вірусних інфекціях. Вона заснована на здатності антитіл імунної сироватки нейтралізувати інфекційні властивості вірусів при введенні суміші в організм сприйнятливих тварин або в культуру тканин. Для визначення індексу нейтралізації постійну дозу сироватки змішують з різними розведеннями вірусів, а для визначення титру антитіл - різні розведення сироватки з постійною дозою вірусів. Контролем служить зараження тварин (або культури тканин) сумішшю вірусів з нормальною сироваткою або з фізіологічним розчином. Реакцію нейтралізації ставлять не тільки для виявлення антитіл, але і для визначення виду і типу вірусів.

Реакція зв'язування комплементу [наприклад, Борде - Жангу реакція (див.)] Використовується для виявлення як вірусних антигенів, так і антитіл. У першому випадку в реакції взаємодіють свідомо відома імунна сироватка і матеріал, в якому передбачається наявність антигенів: сироватка крові, носоглоткові змиви, екстракти тканин інфікованого організму. У другому випадку - свідомо відомий антиген (диагностикум) і сироватка хворого або реконвалесцента.

РСК використовується для діагностики захворювань, що викликаються вірусами грипу, віспи, поліомієліту, свинки, аденовірусами і арбовирусами.

Реакція преципитации в агарі заснована на утворенні смуги преципітації на місці контакту антигену з антитілами в шарі агару між лунками, заповненими вірусним антигеном і імунної сироваткою. Реакцію застосовують для вивчення антигенної структури вірусів і для діагностики деяких інфекцій - віспи, поліомієліту, епідемічного гепатиту.

Реакцію гемаглютинації, засновану на властивості багатьох вірусів викликати агглютинацию (Склеювання) еритроцитів різних тварин (курей, гусей, морських свинок) і людини, використовують для виявлення вірусів. Антивірусна сироватка пригнічує гемагглютінірующімі активність вірусів, і це явище під назвою реакції гальмування гемаглютинації (РГГА) широко використовують для діагностики грипу, свинки, віспи, деяких енцефалітів.



РедагуватиУ обранеДрук

Схожі питання


Увага, тільки СЬОГОДНІ!
» » Вірусологічні дослідження