5850 авторів і 31 редактор відповіли на 28952 питання,
розмістивши 29771 посилання на 8900 сайтів, приєднуйтесь!

Борді - Жангу реакція

РедагуватиУ обранеДрук

Борді - Жангу реакція (реакція зв'язування комплементу, РСК) - імунологічна реакція, заснована на властивості комплексу «антиген - антитіло» фіксувати вільний комплемент. РСК протікає у дві фази: 1) адсорбція антитіл на антигенах- 2) вираз реакції в присутності гемолітичної системи (гемоліз). Для постановки РСК досліджувані об'єкти (антитіла і антигени) поміщають в умови, що забезпечують їх взаємодію у присутності комплемента- потім до аналізованої імунній системі додають «індикатор» - гемолитическую систему. Якщо комплемент фіксувався імунною системою, гемолізу не відбувається (позитивна РСК- мал., А) - якщо ж імунна система не фіксувала комплемент та її компоненти не відповідають один одному, гемоліз відбувається (негативна РСК- рис., Б). Інгредієнти реакції: 1) випробовувана сироватка, інактивована прогревом протягом 30 хв. при t ° 56 ° - 2) антиген (суспензії бактерій, екстракти органів і тканин, віруси) - 3) комплемент (свіжа сироватка морської свинки) - 4) гемолітична система (сенсибілізовані еритроцити барана, інкубовані з гемолітичною сироваткою протягом 30 хв. при t ° 37 °). Для розведення інгредієнтів використовують ізотонічний розчин хлориду натрію. Перший етап РСК триває 60 хв. при t ° 37 ° або 18-20 годину. при t ° 4-6 ° (більш чутлива РСК), другий етап - 60 хв. при t ° 37 °.

У діагностичній практиці і судовій медицині використовують різні модифікації РСК - якісні і кількісні. Див. Також Вассермана реакція, Серологічні дослідження.

Борді - Жангу реакція [J. Bordet, О. Gengou- син .: реакція відхилення комплементу, реакція фіксації алексина (комплементу), реакція зв'язування комплементу (РСК)] - імунологічна реакція, заснована на властивості комплексу антиген - антитіло фіксувати вільний комплемент. РСК протікає в 2 фази: 1) адсорбція антитіл на антигени, 2) вираз реакції (бактеріоліз або гемоліз), для якого необхідна присутність комплементу. Залежність бактеріолітіческій реакцій від присутності комплементу дозволяє виявити взаємодію антитіл з антигенами в реакції Борде - Жангу. Показником відповідності антитіл в цій реакції служить фіксування комплементу відповідними імунними системами, що виявляється додаванням до реакційної суміші «індикаторної» гемолітичної системи.

Реакція Борде - Жангу здійснюється в два етапи: спочатку досліджувані антигени і антитіла поміщають в умови, що забезпечують їх взаємодію в присутності комплементу, а після завершення адсорбції до аналізованої імунної системи додається гемолітична система (гемолізін + + еритроцити). При відповідності антигенів і антитіл відбувається їх взаємодія і присутній в реагує суміші комплемент фіксується імунною системою. У цьому випадку при додаванні індикаторної системи гемолізу не відбувається через відсутність комплементу (реакція позитивна). Якщо аналізовані антитіла не адсорбуються на антигени, то комплемент в реагує суміші залишається вільним і при додаванні гемолітичної системи здійснюється гемоліз (реакція негативна).



Принцип розробленого Борде і Жангу методу серологічного аналізу ліг в основу численних модифікацій реакції, використовуваної в діагностичній практиці та науково-дослідній роботі.

Звичайна РСК, при якій реєструється 100% лізис еритроцитів, передбачає необхідність попереднього титрування комплемента- останній додається до імунної системи в дозі, що не перевищує необхідної для гемолітичної реакції. Схеми постановки реакції визначаються її метою. У досвіді можуть випробовуватися різні дози антигену при постійному вмісті сироватки і комплементу, різні розведення сироватки при постійних дозах антигену і комплементу і т. Д. Інгредієнтами реакції є: 1) випробовувана сироватка, прогріта протягом 30 хв. при 56 ° з метою інактивації присутнього в ній комплемента- 2) антигени (в якості яких використовують суспензії бактерій, екстраговані з них білки, полісахариди та ін.), екстракти з клітин рослин і тварин, віруси і т. д., 3) комплемент - свіжа сироватка морських свинок, 4) гемолітична система (сенсибілізовані баранячі еритроцити) - 5% суспензія еритроцитів, які контактували з гемолітичною сироваткою протягом 30 хв. при t ° 37 °.



Для розведення інгредієнтів використовують фізіологічний розчин NaCl. Антікомплементарние окремих інгредієнтів випробовується в контрольних пробах. Перший етап реакції (адсорбція антитіл) здійснюється при t ° 37 ° протягом 60 хв. або при 4-6 ° протягом 18- 20 год. (РСК на холоді). В останньому випадку відбувається більш повне фіксування комплементу, що збільшує чутливість методу. На другому етапі реакційні суміші витримують при t ° 37 °. Результат реєструють в момент 100% гемолізу в контрольних пробах.

У діагностичній практиці використовують активні, а також «непрямі» методи реакції зв'язування комплементу, є модифікаціями реакції Борде - Жангу. У перших з них показником реакції служить зміна змісту комплементу в випробуваної сироватці. Другі засновані на тому, що при деяких захворюваннях сироватки не містять антитіл комплементсвязивающіх, але здатні запобігати реакції з сироватками, що володіють комплементсвязивающіе активністю.

Найбільша чутливість і точність властива кількісної РСК, в якій реєструють гемоліз в зоні часткового лізису. Чутливість даної модифікації реакції Борде - Жангу обумовлена тим, що в середній зоні лізису (20-80%) відношення кількості комплементу до кількості лізіруемих еритроцитів має лінійний характер. В основі цієї реакції лежить спеціальний метод титрування комплементу, кількість якого виражається в 50% одиницях (СН50) і підраховується на основі рівняння Крога, що представляє хід гемолізу в зоні часткового лізису.

Ступінь гемолізу встановлюється за допомогою спектрофотометра або фотоелектроколориметра.

Кількісна РСК в свою чергу має ряд модифікацій. Зокрема, мікрометод забезпечує більшу точність визначень при малій витраті інгредієнтів.



РедагуватиУ обранеДрук


Увага, тільки СЬОГОДНІ!
» » Борді - Жангу реакція