Люмінесцентна мікроскопія - оптичне дослідження мікрооб'єктів, пофарбованих спеціальними барвниками (флюорохромами), що випускають світіння при впливі ультрафіолетовими променями. Для люмінесцентної мікроскопії застосовуються спеціальні оптичні пристрої, мікроскопи, основною частиною яких є джерело ультрафіолетових променів і система фільтрів до нього.
Флюорохромами, як правило, флюоресцируют по-різному залежно від хімічного складу структур, з якими вони взаємодіють. Деякі з них володіють спорідненістю до певних клітинним структурам. Наприклад, акридіновий помаранчевий барвник забарвлює нуклеопротеїни клітини, аурамін - воскоподобное речовина, що міститься в микобактериях. Деякі мікрооб'єкти не вимагають попереднього фарбування флюорохромами і вивчаються за допомогою люмінесцентної мікроскопії без забарвлення. Див. Також Люмінесцентний аналіз, Люмінесценція.
Люмінесцентна мікроскопія (флюоресцентная мікроскопія) - спеціальний вид микроскопирования, заснований на використанні власної (первинної) або наведеної (вторинної) фотолюмінесценції мікроскопічних об'єктів. Видима люмінесценція (див.) Препарату збуджується або синьо-фіолетовим світлом, або ультрафіолетовими променями.
Люмінесцентний мікроскоп в принципі - звичайний біологічний мікроскоп, забезпечений двома світлофільтрами: один пропускає тільки збуджують синьо або ультрафіолетові промені (його поміщають перед джерелом світла), інший поглинає ці промені і пропускає тільки більш довгохвильовий світло люмінесценції препарату (його встановлюють в тубусі або на окулярі мікроскопа). Джерелами світла служать ртутно-кварцові лампи надвисокого тиску (типу ДРП1) або лампи розжарювання точкового типу. Яскраве кольорове світіння предметів на темному фоні забезпечує високий контраст. Оптико-механічна промисловість випускає спеціальні люмінесцентні мікроскопи і окремі освітлювачі.
Лише деякі біологічно значущі речовини мають виражену власну люмінесценцію у видимій області спектра. До них відносяться деякі пігменти (хлорофіл, порфірини, ліпохроми), вітаміни А і В2, алкалоїди (берберин, хінін та ін.), Антибіотики (тетрациклін та ін.), Хіміотерапевтичні та токсичні речовини. Проникнення цих речовин в органи і клітини, їх розподіл і перетворення можуть бути простежені за допомогою прижиттєвої люмінесцентної мікроскопії. Найчастіше в люмінесцентної мікроскопії використовують люмінесцентну «забарвлення» спеціальними речовинами (флюорохромами), вибірково додають тонким структурам клітини і тканин здатність люминесцировать (люмінесцентна цитохімія). Так, наприклад, флюорохром акридіновий помаранчевий застосовують для контрастування ядерних структур, виявлення нуклеїнових кислот, мукополісахаридів, для виявлення мікробів і великих вірусів, для цітодіагностікі, в тому числі розпізнавання в мазках ракових клітин аурамін 00 служить для виявлення кислотостійких бактерій (туберкульозу, прокази) , рикетсій і деяких вірусів-прімулін - для флюорохромірованія елементарних тілець вірусів і розрізнення живих і мертвих клітин фосфін ЗК, нільський блакитний і бензпірен - для локалізації ліпідів у клітинах.
Особливе значення в люмінесцентної мікроскопії надається люмінесцентно-імунологічних методів [Кунео (A. Coons) з співр., 1942, 1950], заснованим на застосуванні люмінесцентно мічених специфічних сироваток (антитіл). Мітчиком частіше служить флюорохром изотиоцианат флюоресцеіна. Одержуваний комплекс «антитіло-флюорохром» дозволяє швидко виявляти, ідентифікувати та локалізувати навіть незначні кількості відповідних антигенів, в тому числі вірусів, рикетсій, бактерій на тлі сторонньої мікрофлори, а також виявляти специфічні білки, ферменти, полісахариди в клітинах і тканинах. Поряд з візуальними спостереженнями і фотографуванням в Л.М. все ширше застосовується об'єктивна реєстрація інтенсивності, спектрів і виходу люмінесценції.
У СРСР розвивається новий вид Л. м.- так звана ультрафіолетова Л.М., за допомогою якої досліджується власна ультрафіолетова невидима в звичайних умовах люмінесценція об'єктів (Е. М. Брумберг), тонко відображає особливості їх фізіологічного стану.
Люмінесцентна мікроскопія клітин і тканин. При люмінесцентної мікроскопії можна вивчати первинну (тканини і органи людини і тварин мають нерізку білясту, блакитну або синю люмінесценцію) і вторинну люмінесценцію клітин і тканин. Вивчення вторинної люмінесценції живих і фіксованих клітин і тканин (після їх «забарвлення» флюорохромами) набуло широкого поширення. При вивченні живих клітин флюоресцирующие речовини застосовують в дуже малих кількостях, що не викликають токсичної дії. В цитологічних дослідженнях Л. м. Застосовують при діагностиці злоякісних новоутворень в зіскрібків, пунктатах, мокротинні, промивних водах. Цей метод дозволяє швидко отримати яскраво пофарбований препарат, в якому атипові клітини виділяються яскравим світінням, відтінками кольору і структурою. Л. м. Застосовується і в гистохимии. Використання акридинового оранжевого дозволяє виявити нуклеїнові кислоти, при цьому ДНК дає зелену, а РНК - червону флюоресценцію. Той же флюорохром в нефіксованих зрізах допомагає виявити мукополісахариди, а при модифікації цього методу - муцини. Фосфін 3R, родамін В, бензпірен та ін. Виявляють в зрізах ліпіди.
Див. Також Мікроскопія.