5850 авторів і 31 редактор відповіли на 28952 питання,
розмістивши 29771 посилання на 8900 сайтів, приєднуйтесь!


Реакція гальмування міграції лейкоцитів (РТМЛ), мікрометод а. Г. Артемової (1973)

РедагуватиУ обранеДрук

Реакція проводиться зазвичай з бактеріальними і лікарськими алергенами, іноді з харчовими. В реакції використовуються гепаринизированной кров хворого і випробувані алергени в тій же концентрації, яка застосовується для шкірного тестування.

Реактиви та обладнання: середа 199, 0,9% розчин хлористого натрію, гепарин, цемент «фосфат», термостат, спіральна центрифуга, мікроскоп, вартові скла, міграційні капіляри Трошанова.



Техніка. У стерильну пробірку, змочену гепарином (1-2 краплі), набирають 3-5 мл крові з вени хворого і швидко перемішують. Потім гепаринизированную кров в обсязі по 0,2 мл наносять на два часові скла, одне з яких є контрольним. На дослідне додають 0,05 мл алергену, а на контрольні-0,05 мл середовища 199 або 0,9% розчину хлористого натрію, використовуваного для розведення алергену. Суміші перемішують окремими скляними паличками. У кожну суміш занурюють кінець пластинки, що містить 5 прямокутних мікрокапілярів з поперечним перерізом 0,4 X 0,15 мм (міграційні капіляри Трошанова). Кінці капілярів замазують свіжоприготовленим цементом «фосфат» (модифікації І. П. Замотаєва із співавт., 1974) і центрифугують спіральної центрифузі УС протягом 5 хвилин при 2800 об / хв. В результаті центрифугування над шаром еритроцитів утворюється шар лейкоцитів. Потім капіляри позначають в термостат при 37 ° С на 18-20 годин під кутом 10 °. Дослідження досвідченого і контрольного препаратів проводять під мікроскопом при малому збільшенні об'єктива (Х20) за допомогою вимірювальної сітки, що вставляється в окуляр (X 4).

Оцінка результатів. Визначається зона міграції лейкоцитів у досвідчених і контрольному мікрокапілярах. Розмір зони міграції лейкоцитів оцінюють за кількістю квадратів сітки, повністю заповнених лейкоцитами. Для кожної проби визначають середню величину з показників 5 контрольних і 5 досвідчених мікрокапілярів з подальшим підрахунком індексу гальмування міграції лейкоцитів (ІТМЛ) за формулою

ІТМЛ = [(Пк - По) / Пк] · 100%,

де Пк - середній показник зони міграції лейкоцитів 5 контрольних, За -5 досвідчених мікрокапілярів (табл. 5).

Реакція оцінюється як негативна, якщо ІТМЛ в дослідному капілярі відрізняється від контрольного менш ніж на 30%, слабо позитивна (+) при розходженні ІТМЛ на 30-40% і позитивна (++), якщо різниця більше 50%.



РедагуватиУ обранеДрук

Схожі питання


Увага, тільки СЬОГОДНІ!
» » Реакція гальмування міграції лейкоцитів (РТМЛ), мікрометод а. Г. Артемової (1973)