Прямі методи в свою чергу можуть бути поділені на 2 групи. Одні з них засновані на визначенні вмісту в органі власних компонентів крові: плазми, еритроцитів або гемоглобіну у тварин in situ або в перфузате після відмивання органу від крові. Інші базуються на визначенні в органах мічених компонентів (плазми або еритроцитів) чужорідної крові і є, по суті, модифікацією методу розведення індикаторів.
Один з методів визначення регіонарних фракцій ОЦК заснований на відмиванні органу від крові з наступним визначенням вмісту гемоглобіну в перфузате. З цією метою кров, отриману при перфузії органу, гемолизируются і порівнюють її екстинкцію при довжині хвилі 810 мкм з гемолізованої кров'ю, отриманої з великих судин. Цей метод в експерименті використовується рідко, головним чином через низку істотних недоліків. Одним з них є те, що не може бути гарантовано повне вимивання всієї крові, особливо якщо органи отримані у тварин з вираженим порушенням органного кровотоку і мікроциркуляції. У таких умовах частина депонованої крові залишається в судинах, де практично відсутній кровообіг. Іншим недоліком є обмежена кількість органів, кровонаповнення яких може бути вивчено цим методом, оскільки обов'язковою умовою є наявність магістральних артеріальних судин, які постачали б досліджуваний орган або сегмент тіла і не анастомозірованной з судинами сусідніх областей. Тому даний метод можна застосовувати для вивчення кровонаповнення печінки, серця, легень, нирок, але не може бути використаний для вивчення фракцій ОЦК в окремих сегментах тулуба, м'язах, кістках і т. Д.
Проте вказаний метод застосовується для визначення вмісту крові в легенях в нормальних умовах і при гострих змінах легеневого кровотоку (Д. П. Дворецький, 1970, 1971).
Автором, зокрема, встановлено, що у кішок зміст крові в легенях становить 5,0 ± 1,0 мл на 1 кг ваги тварини, а при збільшенні тиску в легеневій артерії кровонаповнення легенів, за даними автора, збільшується вдвічі. Ці цифри відповідають результатам наших досліджень, отриманим методом розведення радіоактивних індикаторів (Г. С. Мазуркевич із співавт., 1971, 1972).
Метод визначення кровонаповнення органів і тканин за вмістом у них індукованих форм гемоглобіну позбавлений деяких зазначених недоліків (В. А. Бернштейн, 1964). При визначенні кровонаповнення цим методом гемоглобін, що міститься у внутрішніх органах, шкірі і кістках, перекладається з допомогою розчину соляної кислоти в ацетоні (1 частина 2N HCl на 19 частин ацетону) в солянокислий гематин, зміст якого визначають за допомогою фотоелектрокалориметри по оптичної щільності екстракту.
Для визначення кровонаповнення м'язів гемоглобін крові, що міститься в них, переводиться в карбоксигемоглобин пропусканням через тканинний екстракт газової суміші з вмістом 60-90% СО. В результаті цієї процедури і міоглобін м'язів переводиться в карбоксимиоглобин. Подальший хід визначення полягає у вимірюванні оптичної щільності екстрактів на спектрофотометрі при довжинах хвиль 568 і 583,8 мкм (оптична щільність карбоксимиоглобина при цих довжинах хвиль однакова, а карбоксигемоглобина при довжині 568 мкм значно вище, ніж при 583,8 мкм). Подальший розрахунок змісту крові в органах заснований на порівнянні екстинкції навесок тканин і проб крові, отриманих від експериментальної тварини. Таким чином, цей метод має низку переваг порівняно з методом вимивання крові з органів, основним з яких є можливість одномоментного вивчення топографії об'єму циркулюючої крові у великому числі сегментів тіла. Незважаючи на зазначені переваги, він не отримав широкого розповсюдження, головним чином через впровадження ізотопних методів.
Методи розведення радіоактивних ізотопів. Найбільшого поширення у вітчизняній і зарубіжній літературі отримали методи, засновані на розведенні радіоактивних ізотопів (мічений I131 або I125 альбумін людської сироватки, мічені Cr51 або Fe59 еритроцити або одночасне використання обох індикаторів). Метод заснований на визначенні радіоактивності органів і тканин тварин після розведення індикатора в крові і його рівномірного перемішування. Використання цього методу базується на двох основних припущеннях: 1) мічені альбумін і еритроцити рівномірно перемішуються в судинному руслі, і поведінка їх в циркуляції відповідає поведінці плазми і еритроцитів жівотного- 2) зміст мічених альбуміну та еритроцитів в органах відповідає змісту в них власних плазми і еритроцитів тварини.
Докладне обґрунтування методу дано вперше Everett із співавт. (1956), які вивчали в дослідах на щурах розподіл плазми і еритроцитів.
Сторінки: 123456