На основі методу хроматографії в пористому склі (принцип молекулярного сита) в СКБ аналітичного приладобудування (м Ленінград) розроблений автоматичний рідинний хроматограф ХЖ-1302, призначений для визначення молекулярно-вагового розподілу синтетичних і біологічних полімерів в інтервалі молекулярних ваг 3 · 10-2-30 · 10-6. В якості детектора в цьому приладі використаний проточний диференційний рефрактометр. Один цикл визначення при обсязі досліджуваної проби в 1 мл займає близько 4 ч. Габарити приладу - 1700X1450X620 мм, маса -350 кг [14].
Деякі зарубіжні фірми випускають також автоматичні рідинні хроматографи з широкою сферою використання. Вони забезпечуються, як правило, набором колонок для проведення різних аналізів і гнучкою системою для проведення елюції, термостатирования, наступного фарбування фракцій та їх ідентифікації та кількісного визначення. Такі прилади можуть бути використані в багатьох областях біохімії, експериментальної фармакології і токсикології для розведення і аналізу сумішей як білків, так і низькомолекулярних речовин. Як приклад можна привести прилад моделі 034, випускається фірмою «Хітачі» (Японія) спільно з «Перкін-Елмер» (США) [80]. Він забезпечений в якості детектора трьохканальним проточним реєструючим фотоколориметрія, що вимірює і записуючим оптичну щільність елюата в інтервалі довжин хвиль 200-700 нм і дозволяє аналізувати будь суміші речовин біологічного походження. Це настільний прилад, його зовнішній вигляд представлений на рис. 118.
Рис. 118. Рідинний хроматограф типу 034.
Найбільш швидкий, дуже продуктивний і дуже широко поширений в багатьох областях метод газової хроматографії [31, 49], також є різновидом колоночной хроматографії. Завдяки своїй швидкості, високої чутливості і унікальною роздільної силі, цей метод, незважаючи на відносну складність і дорожнечу використовуваної апаратури, знаходить все більше застосування в медицині та біології [5,29,76].
Принцип хроматографічного розділення, як зазначалося вище, полягає в поділі речовини між двома фазами. У рідинної Хроматографії обидві фази є рідинами, у газовій - одна з фаз - газ. Колонка газового хроматографа заповнена інертним високопористим добре проникним для газів твердим підтримуючим матеріалом, поверхня якого вкрита тонкою плівкою нелетучей рідини, що є стаціонарною фазою. Анализируемая суміш в газоподібному стані просувається через колонку в струмі продувається через колонку інертного таза-носія, що є рухомою фазою. Поділ досягається завдяки різному розподілу окремих речовин між стаціонарною і рухомою фазами, внаслідок чого ці речовини різною мірою відстають від струму газу-носія. Речовини, які абсолютно не сорбируются стаціонарної фазою, будуть рухатися по колонці зі швидкістю газу-носія і не будуть розділятися. Звідси зрозуміло, що вибір стаціонарної фази робить вирішальний вплив на якість розділення. Одним з різновидів газорідинної хроматографії є капілярна хроматографія, при якій рідка фаза наноситься безпосередньо на внутрішні стінки капілярної трубки довжиною від десятків до декількох сотень метрів.
В якості твердого носія використовується подрібнений вогнетривку цеглу, цілить 545 та інші матеріали. В якості газу-носія найчастіше застосовуються водень, гелій, азот і аргон.
Досліджувані речовини в процесі поділу повинні бути газоподібними, для чого їх піддають випаровуванню при введенні в колонку. Температура випарників досягає 500 ° С. Максимальні температури колонок для різних приладів коливаються в більшості випадків в межах 250-500 ° С. Це накладає суттєві обмеження на вибір речовин, які можуть безпосередньо аналізуватися методом газової хроматографії. Ці речовини повинні бути, по-перше, досить летючими, т. Е. Володіти низькими температурами кипіння, що дозволяють їм перебувати при температурі колонки в пароподібному стані, і, по-друге, досить термостабільними, т. Е. Розкладатися і не руйнуватися при випаровуванні. Тому в першу чергу метод газової хроматографії в біології був застосований для дослідження летких компонентів тканин і біологічних рідин: жирних кислот і складних ефірів, летючих амінів і аміноспіртов, ефірних масел, стероїдів, газів крові і т. П., А також пестицидів, деяких фармацевтичних препаратів і т. д. Надалі для подолання цих труднощів і отримання можливості аналізу нелетких сполук методом газової хроматографії були розроблені хімічні методи отримання більш летких похідних великого ряду сполук. При цьому за рахунок високої швидкості газовохроматографіческого поділу аналіз суміші амінокислот, наприклад, може бути проведений лише за 1,5-2 год з урахуванням часу на їх хімічну модифікацію замість 4-6 год при використанні стандартних описаних вище аналізаторів амінокислот.