5850 авторів і 31 редактор відповіли на 28952 питання,
розмістивши 29771 посилання на 8900 сайтів, приєднуйтесь!


Денситометр біан-170

РедагуватиУ обранеДрук

Денситометр біан-170

Проведення електрофоретичного розділення є лише першим етапом аналізу досліджуваної суміші. Далі проводиться прояв білкових зон шляхом їх забарвлення з подальшим кількісним виміром змісту кожної фракції. Це може бути здійснено або шляхом елюції барвника з розрізаної відповідно до виявлених зонами паперу і вимірювання оптичної щільності отриманих елюатів за допомогою спектрофотометра, або фотоколориметр, або шляхом прямого денсітометрірованія паперу або іншого носія, за допомогою спеціальних денситометрів з автоматичним записом кривих оптичної щільності і їх інтеграцією. Вітчизняної промисловістю випускається денситометр біан-170. Денситометр біан-170 складається з перетворювача з вимірювачем і кімографа біан-110. Прилад має дві швидкості руху електрофореграми - 30 і 60 мм / хв. У денситометрах, що випускалися до 1975 р, була ще швидкість 15 мм / хв.

Біан-170 може проводити вимірювання як у прохідному, так і у відбитому світлі у синій, зеленою і червоною областях спектру. Одночасне варіювання швидкостей руху електрофореграми та паперової стрічки на чернільнопішущем кімографі дозволяє отримувати різні масштаби запису. Денситометр забезпечений цифровим інтегратором, автоматично визначає площу під заданим ділянкою кривої. Габарити денситометрического перетворювача - 470X275X315 мм, маса-17 кг, інтегратора -225X280X220 мм, маса -5 кг, вимірювача -425x205x280 мм, маса -23 кг і кімографа - 370x205x100 мм, маса - 7 кг. Зовнішній вигляд денситометра біан-170 наведено на рис. 103.

Рис. 103. Денситометр біан-170 з кімографа біан-110.



З імпортних приладів в СРСР найбільш поширені і добре себе зарекомендували денситометри фірми «Карл Цейс» (НДР). Ці прилади серії ERI [72] дозволяють отримувати кількісну оцінку електрофореграм на папері, агарі і ацетаті целюлози, забезпечені інтегратором і можуть робити вимірювання як у прохідному, так і у відбитому світлі.



Метод аналітичного електрофорезу на папері знайшов широке застосування для дослідження сумішей білків і протеидов не тільки в науково-дослідній, але і в клінічній практиці при дослідженні сироватки крові [12]. Кращі результати отримані при проведенні електрофорезу сироватки в 0,1 М вероналмедіналовом буфері, при рН-8,6. При рутинному веденні аналізу легко визначається 5 фракцій - альбумін,?,? 2,? і? глобуліни, а окремими методичними прийомами вдається отримувати на папері до 9 фракцій [10]. Проведення на папері ензімелектрофореза [21], що полягає у виявленні на папері смуг зі специфічною ферментативної активністю, дозволило використовувати цей метод при дослідженні та клінічному виявленні ензимопатій.

Описана апаратура, придатна для роботи з невеликими величинами напруженостей електричного поля і добре зарекомендувала себе при дослідженні білків, виявилася непридатною для розділення сумішей низькомолекулярних речовин, наприклад продуктів гідролізу білків - амінокислот і пептидів. Зважаючи високих швидкостей поступальної дифузії низькомолекулярних речовин для досягнення задовільного

поділу необхідно було істотно збільшити їх електрофоретичної рухливість, для чого довелося підвищити напруженості електричного поля з 2-5 до 20-50 В / см, т. е. перейти до високовольтного електрофорезу. На електрофоретичні камери довелося подавати напруги постійного струму до 1500 В і вище. При цьому нагрів паперу зріс настільки, що працювати без гарної системи охолодження стало практично неможливо. Найбільш вдалим виявилося приміщення паперу поверх одного або між двома блоками з подвійними стінками, охолоджуваними проточною водою з водопроводу (взимку) або проміжного холодильного термостата. Високовольтний електрофорез знайшов найбільше застосування в так званому методі «відбитків пальців», т. Е. Визначенні пептидного складу білкових гідролізатів шляхом проведення поділу досліджуваного гідролізату за допомогою електрофорезу в одному напрямку і хроматографії - в перпендикулярному. При цьому аналіз проводиться на великих аркушах паперу розмірами 30x40 см або ще більше. Зрозуміло, що охолоджуючі блоки повинні мати аналогічні розміри. Блоки з металу (нержавіючої сталі або дюралюмінію) володіють більшою теплопровідністю, забезпечують ефективне охолодження і не вимагають додаткових прокладок для електричної ізоляції паперу від охолоджуючого блоку.

Вітчизняної промисловістю намічений випуск приладу для високовольтного електрофорезу, призначеного для аналізу низькомолекулярних сполук при зниженій температурі (від -5 ° до + 10 ° С) марки ПВЕ-1.



РедагуватиУ обранеДрук

Схожі питання


Увага, тільки СЬОГОДНІ!
» » Денситометр біан-170