Останнім часом ВКВ аналітичного приладобудування АН СРСР у Ленінграді розроблений вельми повний і зручний комплект обладнання для тонкошарової хроматографії КТХ-01 [20]. В залежності від призначення комплект може поставлятися повним (КТХ-01-01), середнім (КТХ-01-02) і малим (КТХ-01-03). Особливо цінними в наборі є обладнання для нанесення шару речовин на скляні пластинки з регульованою товщиною від 0,05 до 2 мм і автоматичні дозатори для нанесення на пластинки проб, що дозволяють наносити 0,1 - 100 мкл досліджуваного розчину зі швидкостями 4, 8, 12, 32, 36 і 72 мкл / год. Можливо нанесення проб у звичайній і інертній атмосфері. Крім того, набір включає в себе спеціальний пристрій для проведення градієнтної елюції хроматограмм при подачі елюента зі швидкостями 0,23- 0,56- 2,3 і 5,2 мл / хв. Для попередньої активації пластинок, покритих шаром целюлози, їх сушіння та прояви деяких типів забарвлення передбачені термостатовому камери на температури в межах від 35 до 225 ° С з точністю термостат1фованія ± 2 ° С.
У відсутність описаного комплекту можна з успіхом застосовувати тонкошарову хроматографію, користуючись простими саморобними пристроями, аналогічними входить в комплект або описаним при викладі методу хроматографії на папері. Ряд іноземних фірм, у тому числі широко відома фірма хімреактивів «Мерк» (ФРН), випускає вже готові для проведення тонкошарової хроматографії пластинки, покриті целюлозою М N 30, силікагелем або деякими іонообмінними смолами.
Методи хроматографії на папері і особливо в тонкому шарі є високочутливими швидкими аналітичними методами. При збільшенні товщини шару до 2 і навіть 4 мм метод тонкошарової хроматографії може вже постати в мікро- і полумікропрепаратівном варіанті.
Препаративне поділ речовин або виділення окремих компонентів сумішей здійснюється виключно методами колоночной хроматографії.
Процедура рідинної хроматографії [37] на колонці складається з наступних основних елементів:
1) підготовка колонки, що включає заповнення її відповідної хроматографічної средой-
2) нанесення проби і проведення елюціі-
3) аналіз одержуваного елюата-
4) препаративний збір отриманих фракцій.
У цій послідовності ми спробуємо викласти основні вимоги, що пред'являються до апаратури, що служить для виконання зазначених етапів хроматографічного розділення [13, 68, 72].
Вибір апаратури починається з вибору основного інструменту поділу - колонки. Вибір розмірів колонки і швидкості елюції не є однозначним. Практично в звичайних лабораторних установках при використанні працюють при не дуже великих тисках скляних колонок і часи поділу, що характеризуються годинами, достатню роздільну здатність можна отримувати при відносинах довжини колонки до її діаметра в межах 10-30. У промислових рідинних хроматографах, наприклад типу автоаналізаторів амінокислот, це відношення іноді досягає ста і більше, а в газорідинних хроматографах - тисячі і багатьох тисяч. Необхідно враховувати, що швидкість елюції при проведенні сорбційної та іонообмінної хроматографії повинна узгоджуватися з часом встановлення рівноваги, яка залежить від ряду факторів - природи поділюваних речовин, типу і форми смоли, температури та ін.
Конструкція колонки повинна передбачати наявність в її нижній частині пористої перегородки для підтримки наповнювача. Можливе застосування фільтрів з пористого скла, але краще - з пористого поліетилену. Зручно розташовувати такий фільтр на вставленому в колонку поршні, забезпеченому одночасно вузьким отвором для проведення елюції. Наявність двох таких поршнів з перегородками в нижній і верхній частинах колонки, між якими розташовується наповнювач, дозволяє при бажанні легко регулювати робочу довжину колонки, звести до мінімуму мертві обсяги в ній і здійснювати елюція знизу вгору по довжині колонки, що в ряді випадків забезпечує краще поділ і необхідно при проведенні рециркуляционной (т. е. багаторазової) хроматографії або застосуванні сильно ущільнюючого наповнювача, що володіє малою механічною міцністю. Термостатування колонки дозволяє отримувати більш відтворювані результати. У ряді випадків хроматографії застосовується программированное зміна температури колонки.
Деякі зарубіжні фірми виготовляють хроматографические колонки різних розмірів від невеликих лабораторних аж до напівпромислових зразків. На рис. 110 представлений зразок хроматографічної колонки, що випускається фірмою ЛКБ (Швеція).
Рис. 110. Хроматографічна колонка.
Фірма випускає забезпечені термостатують сорочкою лабораторні колонки 20 розмірів діаметрів від 6 до 25 мм і довжиною від 15 до 100 см, розраховані на тиску від 10 до 80-105 Па [45].
Для проведення елюції, а також регенерації і промивання колонки в неї необхідно подавати елюіруют або промивної розчин з певною і постійною швидкістю. Для цього цілком достатньо гідростатичний тиск 2 м. Однак зручніше застосування циркуляційних насосів.