5850 авторів і 31 редактор відповіли на 28952 питання,
розмістивши 29771 посилання на 8900 сайтів, приєднуйтесь!

Бактеріальна культура

РедагуватиУ обранеДрук

Бактеріальна культура - штучно вирощується на поживних середовищах скупчення бактерій одного виду, що є нащадками однієї бактеріальної клітини. Бактеріальні культури зберігається твердих (1,5-2% м'ясо-пептони агар), напіврідких (0,5-0,7% м'ясо-пептони агар) або рідких (м'ясо-пептони бульйон) поживних середовищах (див.).

Для тривалого зберігання бактеріальну культуру лиофилизируют (див. Зневоднення) і поміщають в ампули. При відсутності ліофільної сушки бактеріальні культури зберігають у пробірках на поживних средах- стерильну ватну пробку всувають всередину пробірки і заливають тонким шаром парафіну. Для зберігання бактеріальних культур зручно користуватися пробірками з нагвинчують пробками. Більшість бактеріальних культур краще зберігається при температурі не вище 5-7 °.

Пробірки або ампули з бактеріальною культурою постачають етикетками із зазначенням назви, номери і дати виділення. Всі бактеріальні культури, що виділяються або зберігаються в лабораторії, підлягають реєстрації у відповідності зі спеціальними інструкціями. Див. Також Бактеріологічне дослідження, Колонія бактеріальна.



Бактеріальна культура - культивування популяцій бактерій на тих чи інших поживних середовищах. Культивування бактерій на штучних поживних середовищах лежить в основі всіх мікробіологічних досліджень, що дозволяють з'ясувати морфологічні, фізіологічні та інші особливості бактерій.

Залежно від поживних потреб бактерій бактеріальні культури можуть бути отримані на середовищах, до складу яких входять органічні субстрати, або на сольових синтетичних середовищах, що включають як джерело енергії углеродсодержащие з'єднання. При посіві бактерій на живильні середовища спостерігається складний процес зростання бактеріальних культур, в якому слід розрізняти зростання (збільшення розміру) окремих бактеріальних клітин і їх розмноження, т. Е. Наростання числа життєздатних особин. Зростання окремих бактерій можна спостерігати під мікроскопом або шляхом мікрокінозйомок в спеціальних камерах, процес же розмноження аналізують шляхом висіву на щільні живильні середовища з подальшим підрахунком числа бактеріальних колоній.



У процесі культивування відбувається не тільки розмноження, але і відмирання бактерій. Отже, повне уявлення про інтенсивність розмноження клітин бактеріальних культур можна отримати тільки в тому випадку, якщо підраховувати не тільки число життєздатних особин, але і загальна кількість бактерій.

Процес розмноження складається з наступних фаз: 1) пристосування (lag-фаза), 2) інтенсивного поділу (log-фаза), 3) негативного прискорення, 4) стаціонарної фази максимуму, 5) прискореної загибелі, 6) логарифмічною загибелі, 7) зменшення швидкості відмирання. На початку lag-фази, т. Е. Відразу після посіву бактерій в живильне середовище, клітини не діляться, іноді спостерігається зменшення числа життєздатних особей- потім бактерії починають рости, а до кінця lag-фази і ділитися. Логарифмічна фаза зростання бактеріальних культур (log-фаза) характеризується максимальною швидкістю поділу клітин, збільшення числа яких відбувається в геометричній прогресії. При цьому абсолютна більшість клітин ділиться з рівною швидкістю, а загибель їх мінімальна. У фазі негативного прискорення час генерації клітин поступово подовжується, а швидкість розподілу в порівнянні з log-фазою знижується. Це пов'язано з виснаженням поживного середовища, порушенням кисневого постачання і накопиченням токсичних продуктів метаболізму. Одночасно зі зниженням швидкості ділення збільшується відсоток тих, що гинуть клітин, що призводить до уповільнення темпу наростання життєздатних особин в бактеріальної культурі. Наступна фаза-стаціонарна - характеризується рівновагою процесів розмноження і загибелі клітин, внаслідок чого число життєздатних бактерій в 1 мл середовища залишається постійним. Це число відповідає максимальній концентрації (М-концентрація) життєздатних особин бактеріальної культури. Протягом наступних фаз загибель клітин превалює над збільшенням їх числа, в результаті чого кількість життєздатних бактерій знижується. Тривалість фаз росту Б. к., Час генерації та М-концентрація клітин залежать від виду бактерій, складу середовища, посівний дози, віку культури і ряду інших чинників.

З метою отримання великих кількостей бактеріальної маси аеробів бактеріальні культури вирощують в умовах штучної аерації. Це дозволяє досягати значно вищих М-концентрацій у порівнянні з неаеріруемимі бактеріальними культурами. Тривале збереження бактеріальних культур в стані log-фази досягається шляхом поступового і постійного оновлення середовища (проточное культивування). При вирощуванні ауксотрофності мутантів бактерій, т. Е. Бактерій, які втратили здатність синтезувати яку-небудь речовину (амінокислота, азотна основа та ін.), Можуть бути створені умови так званого Хемостат, що забезпечуються постійним додаванням в середу необхідного речовини в певній концентрації. Варіюючи кількість внесеного в середу з'єднання, міняють швидкість ділення ауксотрофності мутантів бактерій. Умови Хемостат можуть бути створені й для бактерій дикого типу в тому випадку, якщо вони не здатні синтезувати будь-які необхідні для харчування речовини.

Все сказане відноситься до чистих бактеріальним культурам, т. Е. До популяцій бактерій одного штаму. Штам - більш вузьке поняття, ніж вигляд (див.). Терміном «штам» позначають зберігаються і перещеплюваних бактеріальні культури того чи іншого виду бактерій, отримані з різних джерел. Виділення чистих Б. к. І їх культивування виробляють спеціальними методами (див. Бактеріологічна техніка). У природних умовах чисті Б. к. Виявляються вкрай рідко. Сапрофітні бактерії, зазвичай населяють організм людини і тварин, а також мешкають у зовнішньому середовищі, складають природні біоценозу (див.), Для яких характерні явища антагонізму, синергізму і т. П. У випадку інфікування організму патогенні бактерії також розмножуються в змішаних популяціях. Отже, якщо для діагностики інфекцій та ідентифікацій бактерій обов'язковою умовою служить виділення чистих бактеріальних культур, то для вивчення процесів, що лежать в основі розвитку інфекційних захворювань, доцільний аналіз явищ, що виникають у змішаних Б. к., Які складаються з популяцій бактерій різних видів і штамів . Дослідження зі змішаними культурами становлять інтерес не тільки з точки зору з'ясування патогенезу інфекційних захворювань, а й з метою вивчення мінливості бактерій, їх еволюції і т. Д. (Див. Мінливість мікроорганізмів). Див. Також Колонія бактеріальна.



РедагуватиУ обранеДрук


Увага, тільки СЬОГОДНІ!
» » Бактеріальна культура