Наступним, другим, етапом визначення статі є визначення гонадного підлоги або, власне кажучи, формування статевих залоз. Цей процес відбувається в ранньому періоді ембріогенезу, тому необхідно знати різницю між визначенням статі і диференціацією статі.
Походження статевих клітин. Довгий час велися суперечки щодо походження статевих клітин: в даний час можна вважати загальноприйнятою теорію про екстрагонадальном походження статевих клітин і про їх міграції (Keimbahn). Ця теорія підтверджується і суттєвою різницею в активності лужної фосфатази первинних статевих клітин і інших клітин целома (McKay і співр., 1953). У земноводних, птахів і ссавців первинні статеві клітини з'являються одночасно з ентодермою (Chiquoine, 1954) - первинні статеві клітини поступово переміщаються в каудальному напрямків у статеві складки. У 8-денного мишачого ембріона вже добре спостерігається міграція зародкових клітин. Якщо зробити пересадку статевих складок до того, як в неї потраплять первинні статеві клітини, розвиваються стерильні статеві залози (Everett, 1943). У зародка людини первинні статеві клітини можна виявити на 12-13-й день ембріонального розвитку-до 5-му тижні первинні статеві клітини досягають статевої складки- під час пересування клітини випускають псевдоподии, тому схожі на амебу.
У тварин часто спостерігається, як первинні статеві клітини не досягають своєчасно статевої складки, в результаті чого виникає дисгенезия яєчників або яєчок. У початковому періоді ембріогенезу зародок є нейтральним щодо статі- в цьому періоді є лише статеві складки по медіолатеральном поверхні вольфова каналу.
Згідно з даними різних експериментальних досліджень, первинні статеві клітини самі по собі не в змозі вплинути на розвиток статевих складок або, іншими словами, на освіту з них остаточних статевих залізні більше того, деякі автори вважають, що для цього процесу зовсім не потрібні первинні статеві клітини (Ingram, 1957).
Прімордіальние статеві залози однакові, незалежно від генетичної статі зародка. Ці недиференційовані статеві залози складаються з коркового шару і мозкової речовини. У розвитку яєчника провідна роль належить корковому прошарку, а в розвитку яєчка - мозкового речовини. Коли довжина зародка досягає 5 мм, з'являється зачаток статевих залізні цей зачаток представляється у вигляді двостороннього потовщення епітелію целома, що вистилає мезонефрос (первинну нирку). Зачатки статевих залоз залишаються нейтральними до тих пір, поки довжина зародка не досягне 15-16 мм. Тоді починається утворення яічка- якщо ж з зачатка статевих залоз утворюються яєчники, то їх диференціація відбувається пізніше (Gillmann, 1948). Яєчко утворюється з мозкової речовини недиференційованої статевої залози в процесі розвитку яєчка відбувається дегенерація коркового шару. Коли довжина зародка досягає 27 мм, розвиток яєчок вже закінчено. Освіта яєчників починається тоді, коли довжина зародка досягає 25- 28 мм-доти прімордіальние статеві залози залишаються нейтральними. Амбісексуальное стан статевих залоз у різних видів хребетних вельми разнообразно- найрідше воно зустрічається у тварин, що мають амнион. Амбісексуальное стан найбільш тривалий у жаб, тому жаби найбільш придатні для дослідів з вивчення механізму гермафродитизму (Witschi).
Вирішальна роль у розвитку остаточних статевих залоз належить зачатку статевих залоз (Gonad-Anlage) - багато авторів вважають, що ще і в цій стадії розвитку статеві клітини знаходяться в амбісексуальном стані (Humphrey, 1957) і що їх диференціація відбувається лише після розвитку статевих залоз.
Досі не з'ясовано, якою речовиною регулюється диференціація статевих залоз. Багато авторів є прихильниками теорії кортико-медуллярного антагонізма- згідно цієї теорії, прімордіальние статеві залози є бісексуальними, але як в кірковому шарі, так і в мозковій речовині прімордіальних статевих залоз утворюється морфогенетическое речовина (Witschi, 1957). Речовина, що володіє феминизирующим дією, назвали кортіціном, а речовина, що володіє маскулінізірующім дією, - медулляріном (Witschi, 1934). Ці дві ферментні системи роблять взаємний інгібіторну дію. Природно, що тут мова йде не про гормони, що виробляються вже сформованими статевими железамі- освіту наведених вище речовин не регулюється гіпофізом. В одному випадку речовина коркового шару пригнічує розвиток мозкової речовини, в іншому - переважає дію мозкової речовини.
У міру зростання зародка за рахунок проліферації відбувається потовщення первинного статевого тяжа, в якому містяться статеві клітини-з первинного статевого тяжа утворюється вторинна статева тяж, з якого в подальшому утворюється корковий шар яічніков- з мозкової речовини утворюється rete ovarii (рис. 4 і 5) .
Рис. 4. Диференціація зачатка статевих залоз.
Рис. 5. Визначення статі.