РБТЛ може проводитися з бактеріальними, лікарськими, побутовими, пилковими алергенами і з неспецифічним стимулятором фітогемагглютініном (ФГА).
Реактиви та обладнання: ФГА (угорський препарат з вихідною концентрацією 4 мг / мл, робоче розведення 0,1 мл ФГА + 1,9 мл середовища 199), середа 199 з додаванням 100 ОД пеніциліну і 50 ОД стрептоміцину на 1 мл середовища, гепарин, барвник аеуреозін Романовського - Гімза, термостат, стерильний бокс, мікроскоп, камера Горяєва, предметні скла, стерильна посуд (пробірки, пастерівські піпетки, піпетки на 1,0 і 5,0 мл, Пеніцилінові флакони і гумові пробки), шприци 1, 10, 20-грамові.
Техніка. У стерильну пробірку- змочену гепарином (0,1 мл на 5 мл крові), вносять венозну кров, перемішують і залишають при кімнатній температурі на 40-50 хвилин. Після осідання еритроцитів пастерівською піпеткою відсмоктують плазму, яка містить лейкоцити, в стерильну пробірку. Відбирають 1 мл плазми для постановки реакції. Підраховують число клітин в рахунковій камері Горяєва (А), що залишилася плазму звільняють від лейкоцитів центрифугуванням (1000 об / хв) протягом 10 хвилин. Аутоплазмой використовують в подальшій роботі для приготування живильного середовища (для культивування клітин), розводячи середовищем 199. Оптимальна концентрація клітин для постановки РБТЛ- 1:106 в 1 л. Для досягнення даної концентрації 1 мл плазми з відомою кількістю лейкоцитів (А) розводять до певного обсягу (х) живильним середовищем х = А: 106 (В 1 л) - кінцевий об'єм суміші, в 1 л якого міститься 1 X 106 клітин. Розведену в потрібної концентрації клітинну суспензію розливають у стерильні Пеніцилінові флакони по З мл, додають по 0,1 мл ФГА (в робочому розведенні), щільно закривають флакони гумовою пробкою і культивують клітини в термостаті при 37 ° С протягом 3 діб. Через трос доби флакони виймають і зливають надосадову рідину, осад на дні флакона ретельно змішують з рештою декількома краплями середовища, можуть провітрювати пастерівську піпетку. Наносять краплю суспензії на предметне скло, підсушують на повітрі, фіксують в метанолі 3 хвилини і фарбують за методом Романовського - Гімза протягом 15 хвилин.
Оцінка результатів. Проглядається 300-400 клітин, при цьому підраховується кількість бластів і бластоподобних перехідних форм лімфоцитів. Підраховується кількість трансформованих клітин у відсотках до загального числа прорахованих клітин (у здорових дітей їх кількість становить 60-70%).
Аналогічно проводиться РБТЛ з алергенами: бактеріальними - в концентрації 1 шкірна доза в 0.1 мл, неінфекційними-1000 PNH в 1 мл, лікарськими речовинами - 10 мікрограмів в 1 мл. Реакція з ФГА служить в якості контролю. При постановці РБТЛ з алергенами кількість трансформованих та перехідних клітин складає більше 3%.