Проводиться з бактеріальними алергенами, іноді з лікарськими, побутовими, пилковими.
Реактиви та обладнання: спирт 96 °, 40% розчин формаліну іейтралний, гематоксилин, йодна кислота (750 мг йодної кислоти розчинити в 150 мл дистильованої води), реактив Шиффа (1 г основного фуксину розчинити в 200 мл гарячої води, кип'ятити 5 хвилин-додати 20 мл соляної кислоти і 1 г метабісульфіту, профільтрувати), 0,1% метиловий зелений. Алергени використовуються в розведенні з 25% розчином цитрату натрію 4: 1. Для діагностики використовуються бактеріальні алергени виробництва Казанського НІІЕМ з етикеткою на ампулах «Для постановки тесту« ППН », термостат, стерильна посуд (пробірки, піпетки), мікроскоп.
Техніка. Для кожного дослідження використовуються дві хімічно чистих і стерильних пробірки - досвідчена і контрольна. Якщо одномоментно проводиться дослідження з декількома алергенами, для кожного з них беруть окрему пробірку, а контрольна залишається спільною. Алергени в суміші з розчином цитрату натрію вносять по 0,02 мл в досвідчені пробірки, а в контрольну пробірку - 0,02 мл 5% стерильного розчину цитрату натрію У кожну дослідну і контрольну пробірки додається за допомогою микропипетки по 0,08 мл крові, взятої з пальця хворого. Нерізкими погойдуваннями кров перемішують з антикоагулянтом, пробірки закривають м'якими пробками і поміщають на 2 години в термостат при 38 ° С. Потім готують мазки на знежирених предметних стеклах, їх маркують і після підсушування на повітрі фіксують протягом 10-15 хвилин сумішшю 96 ° спирту і 40% розчину формаліну (10: 1). Після фіксації мазки відмивають в трьох порціях 96 ° спирту по 10 хвилин в кожній і після просушування фарбують йодною кислотою (у темному склянці 8 хвилин), промивають у 3-х працях дистильованої води по 3 хвилини в кожної, сушать на фільтрувальної папері, обробляють реактивом Шиффа 18 хвилин, потім в 2-х склянках сірчистої води по 2 хвилини, опускають у посудину з проточною водопровідною водою на 30 хвилин. Потім поміщають у склянку з фарбою (0,1% метиловий зелений) на 1-2 хвилини і прополіскують в склянці з дистильованою водою. Витирають марлею з боку скла, сушать на фільтрувальної папері.
Оцінка результатів. Під імерсійною системою мікроскопа в кожному мазку (досвідчених і контрольному) несосчітивается по 100 нейтрофілів, враховуються пошкоджені, зруйновані, що мають амебоидние активність клітини. Результат виражають індексом, який знаходять за формулою
ППН = [Но-Нк] / 100,
де Но - число пошкоджених клітин в дослідному мазку, Нк - аналогічне число в контрольному препараті, 100- кількість поєднаних лейкоцитів у кожному мазку. Тест вважається позитивним, якщо значення ППН перевищує 0,1.