5850 авторів і 31 редактор відповіли на 28952 питання,
розмістивши 29771 посилання на 8900 сайтів, приєднуйтесь!


Прямий базофільний тест по shelly (1962)

РедагуватиУ обранеДрук

Реакція ставиться з неінфекційними алергенами. Побутові, епідермальні, пилкові використовуються в концентрації 1000 PNH в мл, харчові в розведенні з фізіологічним розчином 1: 10 від вихідної стандартної концентрації, антибіотики - в концентрації 1000 ОД / мл, ампулірованной вітамінні препарати в розведенні з фізіологічним розчином 1:10, новокаін- 0.3% розчин, амідопірин - 0,2% розчин, анальгін і сульфаніламіди- 1% розчин, еуфілін - 0,24% розчин, сірчанокисла магнезія - 2,5% розчин. У тесті використовуються лейкоконцентрате, який отримують шляхом центрифугування при 2000 об / хв протягом 5 хвилин крові, взятої з вени хворого в стерильну пробірку, змочену гепарином (3 краплі гепарину на 5 мл крові). Лейкоцитарний шар сірувато-білого кольору, що утворюється на кордоні між плазмою і еритроцитами, набирається пастерівською піпеткою.

Обладнання і реактиви: термостат, центрифуга на 3000 об / хв, мікроскоп бінокулярний, гепарин, 0,3% розчин фарби «нейтральний червоний», вазелін хімічно чистий, стерильні пастерівські піпетки, пробірки, предметні і покривні скла.



Приготування і фарбування предметних стекол. Для приготування 0,3% спиртового розчину фарби «нейтральний червоний» 300 г барвника змішується з 100 мл абсолютного спирту. Для кращого розчинення суміш поміщається в термостат при 37 ° С на добу, періодично помішує, потім фільтрується через фільтрувальний папір. Для знежирення предметні скла містяться в суміші Нікіфорова (спирт і ефір 1: 1). Забарвлення стекол проводиться до реакції: на знежирене предметне скло наносять краплю барвника, висушують при кімнатній температурі. Пофарбовані скла можуть зберігатися протягом декількох місяців.

Техніка реакції. На попередньо знежирене і забарвлене 0,3% спиртовим розчином «нейтрального червоного» предметне скло наносять 0,05 мл лейкоцитарної суспензії хворого і 0,05 мл алергену, перемішують і покривають покривним склом, краю-якого змазані вазеліном- залишки суспензії промокають. Паралельно готується 2 контрольних мазка: 1-й з алергеном, до якого у хворого немає підвищеної чутливості, 2-й-с тест-контрольної рідиною, на якій готується алерген. Досвідчений препарат і контрольні поміщають в термостат при 37 ° С на 15 хвилин-потім під імерсійною системою мікроскопа (при збільшенні 600) підраховується 40 базофілів в кожному препараті і відзначають серед них кількість морфологічно змінених і дегранулірованних клітин.

Оцінка реакції. Тест вважається позитивним, якщо відсоток змінених базофілів в досвіді перевищує такий в контролі більш ніж на 10%. При цьому реакція вважається слабоположительной, якщо відсоток дегранулірованних клітин становить 11 - 15%, помірно позитивною (+ +) - якщо він перевищує контрольний на 16-20% і різко позитивною (+ + +) - при дегрануляції базофілів в досвіді вище контрольного більш ніж на 20%. Число дегранулірованних клітин у контролі не повинно бути більше 1-2 (3-5%).



РедагуватиУ обранеДрук

Схожі питання


Увага, тільки СЬОГОДНІ!
» » Прямий базофільний тест по shelly (1962)