Інструкція по застосуванню - ХЛАМІДЕР
Перед покупкою ліків ХЛАМІДЕР уважно прочитайте інструкцію із застосування, способи застосування та дози, а також іншу інформацію з лікарського препарату ХЛАМІДЕР. У довіднику ліків на МедКруг.ру ви можете знайти необхідну інформацію: відгуки, інструкцію по застосуванню, ефективність
| Ліофілізат для діагностичних цілей | |
| ліофілізована 3% суспензію з обсягу 1 мл формалінізірованних танізірованних еритроцитів барана, на поверхні яких адсорбований родоспеціфіческому хламідійний антиген, виділений з хламідій псіттаці, вирощених в желточних мішках курячих ембріонів | |
Показання
Визначення специфічних антитіл до хламідій у сироватках людей і тварин.
Спосіб застосування та дози
.Реакцію непрямої гемаглютинації (РНГА) проводять мікрометодом в полістиролових пластинах з U-подібними лунками мікротитратор Такач (Угорщина) або в полістиролових планшетах для імунологічних реакцій одноразового використання.
Попередження. Препарат Хламідер® є біологічно безпечним, тому містить неінфекційний антиген і інактивовану контрольну сироватку.
Разом з тим, з усіма тестованими зразками, стічними розчинами, а також з устаткуванням і матеріалами, що знаходяться з ними в контакті, слід звертатися як з інфекційним матеріалом:
- працювати в гумових рукавичках, що не піпетувати розчини ротом;
- піпетки, посуд та інше обладнання, що стикається з кров'ю, обов'язково обробляти дезінфікуючими розчинами (замочувати 5% розчином хлораміну на 24 год).
Приготування реагентів і розчинів. Для проведення реакції вміст ампули з хламідійним або контрольним діагностикумів розчиняють в 1 мл очищеної (дистильованої) води. Час розчинення не повинно перевищувати 1 хв при температурі (20 ± 2) ° C до утворення при струшуванні рівномірної суспензії коричневого кольору. Після розчинення до початку використання діагностикуми витримують протягом 1 год при температурі (20 ± 2) ° C. Рідкий препарат придатний для вживання протягом 9 год. Перед використанням диагностикум ретельно взмучивают піпетуванням.
Хламідійну сироватку, прикладену до Діагностикум еритроцитарний хламидийному в якості позитивного контрольного зразка, розчиняють в 2 мл формалінізірованних фізіологічного розчину (ФФР)1 рН 7,2-7,4, отримуючи розведення сироватки 1:20.
Проведення РНГА. Послідовні розведення досліджуваних сироваток готують на ФФР рН 7,2-7,4. Для цього в ряд лунок крапельницею мікротитратор Такач (2 краплі) або мікропіпеткою місткістю 0,1 або 0,2 мл наливають по 0,05 мл ФФР. У першу лунку вносять 0,05 мл досліджуваної сироватки, попередньо розведеною 1:20, після перемішування піпеткою переносять 0,05 мл в другу лунку, з другої - в третю і т.д. З останньої лунки 0,05 мл кінцевого розведення досліджуваної сироватки виливають. Потім в кожну лунку вливають по 0,01 мл диагностикума еритроцитарного хламидийного. Вміст лунок ретельно перемішують постукуванням по краях пластини і залишають при температурі (20 ± 2) ° C.
Реакцію супроводжують такі контролі.
1. Контроль диагностикума еритроцитарного хламидийного на відсутність спонтанної аглютинації: в три лунки, що містять по 0,05 мл ФФР, додають по 0,01 мл хламидийного диагностикума.
2. Позитивний контроль: проведення РНГА з хламідійною сироваткою, що додається до препарату. Готують послідовні розведення цієї сироватки в обсязі 0,05 мл від 1:40 до розведення, в два рази перевищує титр даної сироватки, який вказаний на етикетці. Після цього в кожну лунку вносять по 0,01 мл хламидийного диагностикума.
3. Контроль на специфічність взаємодії досліджуваної сироватки з діагностикумом еритроцитарних хламідійним (виняток реакцій, обумовлених антитілами до яєчного компоненту) - проведення РНГА з діагностикумами еритроцитарних контрольним. Готують послідовні розведення досліджуваної сироватки, аналогічні разведениям досвідченого ряду, і в кожну лунку додають по 0,01 мл диагностикума контрольного.
4. Контроль диагностикума еритроцитарного контрольного на відсутність спонтанної аглютинації: в три лунки, що містять по 0,05 мл ФФР, додають по 0,01 мл контрольного диагностикума.
При проведенні контролів всі умови повинні бути рівнозначні умов проведення основного досвіду.
Облік результатів. Результати враховують через 4 години після завершення проведення реакції.
Облік результатів проводять візуально за ступенем аглютинації еритроцитів, по четирехкрестной системі:
++++ - агглютинировать еритроцити рівним шаром вистилають дно лунки, утворюючи за формою купол;
+++ - на тлі рівномірно агглютинировать еритроцитів відзначається широке кільце з тонким нерівним «фестончатим» краєм, що представляє собою неагглютініро-вавшие еритроцити;
++ - на тлі рівномірно агглютинировать еритроцитів відзначається менш широке кільце з більш рівними краями, що представляє собою осад неагглютініровав-ших еритроцитів;
+ - значна частина еритроцитів НЕ аглютинується і осідає на дно лунки у вигляді кільця з чітким краєм, разом з тим є невелика кількість агглютинировать еритроцитів;
- - еритроцити осідають в центрі лунки у вигляді диска або компактного кільця з чітким краєм, пластівці агглютинировать еритроцитів відсутні.
Реакція вважається позитивною при вираженості аглютинації не менше, ніж на +++.
Реакцію вважають специфічною в тому випадку, якщо:
1. Контролі 1, 3, 4 негативні. Якщо досліджувана сироватка реагує з контрольним діагностикумів в такому ж розведенні, що і з діагностикумом еритроцитарних хламідійним, то реакція розцінюється як неспецифічна.
2. Діагностикум еритроцитарний хламідійний аглютинується хламідійної сироваткою до її титру, вказаного на етикетці ампули.
За титр досліджуваної сироватки приймають її найбільше розведення, яке ще викликає аглютинацію еритроцитарного диагностикума не менше, ніж на +++.
Діагностичним титром при одноразовому дослідженні вважають розведення 1:80 і вище.
Можливі перехресні позитивні реакції в низьких титрах із сироватками, імунними до рикетсіями Провачека.
1 Готують за наступною прописи: хлорид натрію за ГОСТ 4233-77 - 8,5 г; формалін по ГОСТ 1625-75 - 3 мл; вода дистильована за ГОСТ 6709-72 - до 1 л. рН повинен бути від 7,2 до 7,4. Корекцію проводять розчином гідроксиду натрію або соляною кислотою в концентрації 0,01 моль / л.